日時：２０００年５月２７日（土）14:00 - 16:30
場所：盛岡市上田公民館第一集会室
テーマ：目で見るサイエンスー（１）
「動画で見るゼブラフィッシュの血管アトラス」
磯貝 純夫（岩手医科大学医学部解剖学）
現在、ゼブラフィッシュDanio rerioは遺伝学および実験発生学の分野で脊
椎
動物のモデルシステムとして広く使われており、透明な初期胚は循環系の発生
過
程を追究する上で極めて有用である。主要血管の発現を規定する遺伝子の特定
に
あたって、野生種とミュータント種の血管の形態形成過程を詳細にしかも継続
的
に比較することが必要となった。この目的のため、 "生きている"ゼブラフィッ
シュ胚の血管系を三次元的に微細解剖することができる「Microangiography法
」
を開発した。
麻酔した受精後１日胚（心臓拍動開始期）〜７日胚（卵黄吸収期）の静脈洞
あ
るいは心室からマイクロマニュピュレーターに着装したマイクロシリンジによ
り
蛍光ビーズ（直径0.01μm : Molecular Probes 社）を注入して、
心臓の搏動を利用して全身に行き渡らせた。注入後約１５分以内に、共焦点レ
ー
ザー顕微鏡を使用して、ラベルした胚の光学的連続切片（約５μm）を得、3次
元
再構築ソフト（Metamorph：Universal Imaging社）により、各発生段階毎の血
管系の三次元イメージを構築した。
ゼブラフィッシュの野生種およびミュータント種の受精後１〜７日胚につい
て、
全身および頭部（鰓弓、脳）、胴部（腸、腎、体壁、脊髄）、尾部（体壁、脊
髄）
血管系の鮮明な三次元イメージを得た。これらのイメージをもとに、野生種に
つ
いて血管系の形態形成過程を詳細に示す"ゼブラフィッシュの血管系の発生解剖
アトラス"を作成した。様々な血管系の形態異常を示すミュータント種について
も、それぞれの形態異常が発現する発生段階と部位を特定し、さらに同一個体
に
おいてその後の形成過程を追究している。
このMicroangiography法の最大の特色は生きた胚の血管系を短時間で三次元
的に映像化できることにある。また、胚あるいは幼生に重度の障害を与えるこ
と
なく、新生毛細血管の細部まで可視化できる。従って、同一個体についてその
後
の発生過程を追究することも可能である。さらに、同イメージは解析に際して
、
二次元的光学切片標本としても使用できる。一連の胚期から幼生期に至る血管
系
の三次元イメージは、今後のゼブラフィッシュを使用した血管の分化とパター
ン
形成についての実験発生学、遺伝学的、比較解剖学的研究に基盤を与えるため
の
ものであり、Websiteを通じての利用を前提に準備中である。